L'électrophorèse: ce que c'est, à quoi ça sert et comment c'est fait

L'électrophorèse est une technique de laboratoire réalisée dans le but de séparer les molécules en fonction de leur taille et de leur charge électrique afin de pouvoir diagnostiquer les maladies, vérifier l'expression des protéines ou identifier les microorganismes.

L'électrophorèse est une procédure simple et peu coûteuse, utilisée dans la routine de laboratoire et dans les projets de recherche. Selon le but de l'électrophorèse, il peut être nécessaire d'effectuer d'autres tests et examens pour parvenir à un diagnostic, par exemple.

À quoi ça sert

L'électrophorèse peut être réalisée à plusieurs fins, à la fois dans les projets de recherche et dans le diagnostic, car il s'agit d'une technique simple et peu coûteuse. Ainsi, l'électrophorèse peut être effectuée pour:

• Identifier les virus, les champignons, les bactéries et les parasites, la plus courante étant cette application dans les projets de recherche; Test de paternité; Vérifier l'expression des protéines; Identifier les mutations, être utile dans le diagnostic de la leucémie, par exemple; Analyser les types d'hémoglobine circulante, être utile dans le diagnostic de l'anémie falciforme; Évaluer la quantité de protéines présentes dans le sang.

Selon le but de l'électrophorèse, il peut être nécessaire d'effectuer d'autres tests complémentaires pour que le médecin complète le diagnostic.

Comment c'est fait

Pour faire l'électrophorèse, il faut le gel, qui peut être en polyacrylamide ou agarose selon l'objectif, un tampon d'électrophorèse et une cuve, un marqueur de poids moléculaire et un colorant fluorescent, en plus d'un équipement d'éclairage UV ou LED, également connu sous le nom de transilluminateur.

Après avoir préparé le gel, un objet spécifique doit être placé pour que les puits soient creusés dans le gel, communément appelé le peigne, et laisser le gel se déposer. Lorsque le gel est prêt, appliquez simplement les substances dans les puits. Pour cela, un marqueur de poids moléculaire doit être placé dans l'un des puits, un contrôle positif, qui est la substance qui est connue, un contrôle négatif, qui garantit la validité de la réaction, et les échantillons à analyser. Tous les échantillons doivent être mélangés avec un colorant fluorescent, car il est ainsi possible de visualiser les bandes sur le transilluminateur.

Le gel avec les échantillons doit être placé dans la cuve d'électrophorèse, qui contient la solution tampon spécifique, puis l'appareil est allumé pour qu'il y ait du courant électrique et, par conséquent, une différence de potentiel, ce qui est important pour la séparation particules selon leur charge et leur taille. Le temps de fonctionnement électrophorétique varie en fonction de l'objectif de la procédure et peut durer jusqu'à 1 heure.

Après le temps déterminé, il est possible de visualiser le résultat du parcours électrophorétique à travers le transilluminateur. Lorsque le gel est placé sous une lumière UV ou LED, il est possible de visualiser le motif de bandes: plus la molécule est grande, plus sa migration est petite, plus elle se rapproche du puits, tandis que plus la molécule est légère, plus le potentiel migratoire est grand.

Pour que la réaction soit validée, les bandes du contrôle positif doivent être visualisées et rien ne doit être visualisé dans le contrôle négatif, car sinon cela indique qu'il y a eu contamination, et tout le processus doit être répété.

Types d'électrophorèse

L'électrophorèse peut être réalisée à différentes fins et, selon son objectif, plusieurs types de gel peuvent être utilisés, les plus courants étant le polyacrylamide et l'agarose.

L'électrophorèse pour identifier les micro-organismes est plus courante dans les laboratoires de recherche, cependant, à des fins diagnostiques, l'électrophorèse peut être utilisée pour identifier les maladies hématologiques et les maladies qui évoluent avec l'augmentation de la quantité de protéines, étant les principaux types d'électrophorèse.:

1. Électrophorèse de l'hémoglobine

L'électrophorèse de l'hémoglobine est une technique de laboratoire réalisée pour identifier les différents types d'hémoglobine circulant dans le sang, permettant d'identifier la présence de maladies liées à la synthèse de l'hémoglobine. Le type d'hémoglobine est identifié par électrophorèse à un pH spécifique, idéalement entre 8, 0 et 9, 0, avec un modèle de bandes vérifiable qui peut être comparé au modèle normal, permettant l'identification de la présence d'hémoglobines anormales.

À quoi cela sert-il: l' électrophorèse de l'hémoglobine est effectuée pour étudier et diagnostiquer les maladies liées à la synthèse de l'hémoglobine, telles que l'anémie falciforme et l'hémoglobine C, en plus d'être utile pour différencier la thalassémie. Apprenez à interpréter l'électrophorèse de l'hémoglobine.

2. Électrophorèse des protéines

L'électrophorèse des protéines est un examen demandé par le médecin pour évaluer la quantité de protéines circulant dans le sang et ainsi identifier les maladies. Ce test est effectué à partir d'un échantillon de sang, qui est centrifugé pour obtenir le plasma, la partie du sang constituée, entre autres, de protéines.

Après l'électrophorèse, un modèle de bandes peut être visualisé et, par la suite, un graphique dans lequel la quantité de chaque fraction de protéines est indiquée, étant fondamental pour le diagnostic.

À quoi cela sert-il: L'électrophorèse des protéines permet au médecin d'étudier la survenue de myélome multiple, de déshydratation, de cirrhose, d'inflammation, de maladie du foie, de pancréatite, de lupus et d'hypertension selon le schéma de la bande et le graphique présenté dans le rapport d'examen..

Comprendre comment cela se fait et comment comprendre le résultat de l'électrophorèse des protéines.