Le diagnostic moléculaire correspond à un ensemble de techniques moléculaires qui visent à identifier des changements dans l'ADN qui pourraient être révélateurs de maladies génétiques ou d'un cancer, par exemple. De plus, les techniques moléculaires sont largement utilisées pour l'identification et la confirmation des maladies infectieuses, car elles représentent une méthode de diagnostic plus rapide et plus précise.
Le diagnostic moléculaire est coûteux et, par conséquent, n'est pas demandé très souvent par les médecins, cependant, il donne des résultats précis en ce qui concerne la présence du changement, la façon dont il peut interférer avec le fonctionnement de l'organisme et la réponse du patient à traitement.
À quoi ça sert
Le diagnostic moléculaire peut être réalisé avec plusieurs objectifs, les principaux étant:
- Identification des mutations liées à la leucémie, telles que l'identification de la translocation BCR-ABL, qui est caractéristique de la leucémie myéloïde chronique (LMC); mutations caractéristiques des maladies hématologiques, telles que l'hémochromatose héréditaire, la polycythémie vraie, la thrombocythémie essentielle et la thrombophilie, par exemple Changements moléculaires qui indiquent la survenue d' un cancer, comme le cancer colorectal, pulmonaire, mammaire et cérébral, par exemple; Diagnostic de maladies infectieuses, telles que l'hépatite, l'urétrite, la toxoplasmose, la leishmaniose, etc., en plus de l'identification du virus HPV.
Le diagnostic moléculaire, bien qu'il soit considéré comme coûteux par rapport à d'autres techniques de diagnostic, est plus précis, car il est capable d'informer le changement lié à une certaine maladie et le degré d'influence de ce changement dans le corps, aidant ainsi le traitement de la personne.
En plus d'être utilisées pour le diagnostic de diverses maladies, des techniques moléculaires sont également utilisées pour évaluer la réponse au traitement, en particulier chez les personnes atteintes de cancer, étant l'une des méthodes les plus efficaces pour indiquer la progression et la rechute de la maladie.
Comment c'est fait
Le diagnostic moléculaire peut être effectué avec n'importe quel échantillon, à la demande du médecin, celui qui peut le mieux fournir des informations sur l'état du patient, qui peut être l'urine, la salive ou, dans la plupart des cas, le sang. Il n'est pas nécessaire de jeûner ou de toute autre préparation à l'examen.
L'échantillon est prélevé et envoyé au laboratoire avec les conseils du médecin informant de l'examen ou du type de recherche à effectuer. La technique moléculaire pratiquée dépend de l'examen demandé et implique une série de procédures précises qui visent à identifier la présence ou l'absence de l'altération demandée par le médecin.
Habituellement, seule une petite quantité d'échantillon envoyé est utilisée, le reste étant stocké de sorte que, si nécessaire, l'examen soit répété.
Voir quelles sont les principales techniques moléculaires
PCR
PCR, abréviation de Polymerase Chain Reaction ou Polymerase Chain Reaction , est une technique moléculaire qui consiste à amplifier un fragment de matériel génétique, ADN ou ARN, dans le but d'identifier des mutations et, ainsi, d'aider au diagnostic des maladies.
Cette technique est issue de l'extraction et de la purification du matériel génétique, qui est ensuite placé dans un mélange dont l'un des composants est une enzyme de restriction qui varie en fonction de l'examen demandé et dont la fonction est de couper le matériel en fragments de sorte que la possible altération génétique puisse être identifiée. Le mélange est placé dans un thermocycleur, qui est un appareil qui agit à travers la variation de température indiquée par le professionnel selon l'examen et, ainsi, permet l'amplification du fragment génétique. Dans le cas de la PCR conventionnelle, après amplification, le produit de PCR est soumis à une électrophorèse, qui est une technique moléculaire basée sur le poids et la taille des fragments, c'est-à-dire, selon ces caractéristiques, un motif de bande est généré, dont l'analyse est faite sur la base de la bande de contrôle positive, c'est-à-dire la bande connue pour correspondre à l'altération génétique.
La PCR en temps réel, également appelée qPCR, est un type de PCR quantitative, c'est-à-dire qu'en plus d'identifier l'altération génétique, elle est en mesure de fournir des informations sur l'expression des gènes, c'est-à-dire la quantité d'expression du gène modifié dans l'organisme. ainsi, il peut être utilisé pour faciliter le diagnostic et surveiller le traitement. La PCR en temps réel ne nécessite pas d'électrophorèse, l'ensemble du processus d'amplification et d'analyse du matériel génétique est effectué par un appareil et le résultat est interprété par un professionnel de la santé qualifié.
Séquençage
Le séquençage est une technique moléculaire qui consiste à déterminer la séquence des nucléotides d'ADN, qui sont les unités de formation du matériel génétique. Le séquençage résulte d'une réaction similaire à la PCR, cependant, dans le mélange d'amplification, des nucléotides modifiés sont ajoutés par l'ajout de fluorochromes qui, au fur et à mesure que le matériel est amplifié, les nucléotides modifiés sont incorporés dans l'ADN et génèrent plusieurs fragments, qui correspondent au produit de séquençage.
Le produit de la réaction est placé dans un dispositif appelé séquenceur d'ADN, dans lequel, lorsque les fragments sont atteints par le laser de l'équipement, les fluorochromes sont excités, émettant une fluorescence, qui est indiquée par l'équipement au moyen de pics, à chaque pic correspondant à un nucléotide. À la fin de la réaction, l'équipement informera la séquence d'ADN, pouvant ainsi assister le médecin dans le diagnostic des maladies génétiques.
